In vitro 小核試験の試験条件について
弊社ではCHL/IU細胞を用いてin vitro小核試験を実施しており、試験はGLP（薬機法・OECD）に準拠しております。また、簡易試験については、試験委託者の要望に応じて試験条件を設定します。ここではGLP適用試験、非GLPガイドライン準拠試験（薬機法・OECD）及び簡易試験の試験条件について解説します。
| GLP適用試験/非GLPガイドライン準拠試験 | 簡易試験 （非GLP） |
||
|---|---|---|---|
| 対応ガイドライン | 薬機法 | OECD | |
| 試験の処理条件 | 短時間処理（±S9）及び連続処理（主に24h） | ||
| 最高用量の設定 | 1mM又は0.5mg/mLの 低い方 |
10mM又は2mg/mLの 低い方* |
準拠するガイドラインに応じて設定 |
| 用量設定数（用量設定試験） | 6段階以上 | ||
| 各用量当りのプレート数 | 用量設定試験 1枚、本試験 2枚 | 1枚 | |
| 各用量当たりの観察細胞数 | 2,000個/2プレート | 1,000個/1プレート | |
| 被験物質の必要最低量（g） | 0.5 | 2.0 | 1.0 |
| 所要期間 | 8〜10週間 | 6〜7週間 | |
* 組成が不明な物質や、混合物等の場合5mg/mL
GLP適用試験／非GLPガイドライン準拠試験
用量設定試験1回、本試験2回（短時間処理法･連続処理法）を実施します。各用量あたりのプレート数は用量設定試験については1枚で、本試験については2枚で行います。細胞毒性を示す被験物質についてはガイドラインに記されている細胞毒性指標の範囲を処理条件毎に目標とし、観察に適した細胞標本が得られるまで試験を繰り返し行います。細胞毒性及び被験物質の析出が認められない場合は最高用量から観察を行います。
通常、短時間処理法で陽性結果が得られた場合は連続処理法の本試験は実施しません。陰性陽性の判定は各ガイドラインに基づき統計処理等を用いて判定します。
簡易試験（非GLP）
各用量あたりプレート数1枚で行います。用量設定試験で細胞毒性が認められない、または準拠する試験ガイドラインの細胞毒性指標の範囲に入り、観察に適した細胞標本が得られた場合は1回の試験で終了します。細胞毒性や被験物質の析出により観察に適した細胞標本が得られなかった場合は結果に応じて用量を変更し、2回目以降の試験を行います。利点としましては、短納期、低費用でGLP対応の被験物質のスクリーニング試験としてお使い頂けます。
通常、短時間処理法で陽性結果が得られた場合は連続処理法の本試験は実施しません。陰性陽性の判定は各ガイドラインに基づき統計処理等を用いて判定します。
簡易試験については上記以外の、処理条件を変更したご依頼についても適宜対応いたします。まずは、ご相談ください。
